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肠道感染通过神经内分泌信号调节行为和学习

  1. jogender辛格
  2. 亚历杭德罗·aballay  Is a corresp上ding auth要么
  1. Oreg上 Health & 科学 University, United States
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引用 本文 如: 澳门赌场网站2019; 8:e50033 bt365软件app 10.7554 / elife.50033

抽象

bt365软件app 秀丽隐杆线虫 致病菌和国防确认引发通过激活途径和避免病原体的免疫反应。在这里我们展示致病生产吩嗪的化学感受 铜绿假单胞菌,这导致了DAF-7的快速激活/ TGF-β在神经元ASJ,是的不足病原体回避行为的启发。相反,肠道感染,管腔,依赖于毒力的腹胀 页。铜绿假单胞菌通过调制不仅DAF-7 / TGF-β途径也耦合克受体蛋白NPR-1途径,其中存在aerotaxis控制行为调控两种病原体和厌恶回避学习。由肠道感染这些调制神经内分泌途径作为一种全身性的反馈使动物,以避免有毒细菌。这些结果表明从肠道反馈在感染过程中如何能调节的行为,学习和主机的微生物的看法。

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这种细菌引起的疾病可能是微小的,但可以使用比视觉感官其他动物感染保护自己。一些细菌产生有害的毒素,它可以直观地识别动物是很危险的他们用嗅觉或味觉。这就是所谓的化学感受,反应,使动物对化学刺激的与生俱来的能力。

同时动物,但可以“学习”,以避免有害细菌,虽然他们是如何做到这一点仍不清楚。现在,辛格和作为模式生物研究ESTA现象aballay有无蛔虫。

蛔虫食的细菌,因此,他们需要能够区分间和害的致病株。然而,只有他们开始几个小时的接触,这如果没有一定他们使用化学感受的预期后,避免有害细菌。 ESTA aballay的提示辛格和其他机制,调查是否可以教蛔虫,避免致病细菌,蛔虫比较已暴露于有害的或良性菌株。

观察此前,蛔虫教训,避免有害细菌 bt365软件app 然而,暴露蠕虫通过产生某些化学物质 页。铜绿假单胞菌 是不够的,教他们避免了细菌。取而代之的是,实验表明,当蛔虫引起疾病的细菌摄取,引发肠道感染腹胀。更多的有毒细菌,越肠膨胀,引发有用于氧气的偏好相关联的神经通路。在几个小时内,据悉该蠕虫避免低氧环境相关有了 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app 大肠杆菌。

这些结果表明如何肠道感染可将信号发送到神经系统来调节动物的行为。 ,此外,辛格和aballay已经确定了神经通路,刺激宿主的行为反应,以抵御感染。

介绍

在自然界,所有的生物都暴露在不断复杂的环境,并正在由病原微生物侵袭的威胁。以确保其生存,有机体必须承认病原体及响应他们的攻击安装一个强大的防御能力。此外病原体物理回避是降低防御病原体感染(的关键战略bt365软件app ; Medzhi至v等人的,2012)。细菌的代谢产物和毒素的化学感受出现在病原体引起回避行为发挥了重要作用。在哺乳动物中,嗅觉神经元和化学感受伤害性感觉神经元通过不同的分子机制检测细菌毒素,群体感应分子,甲酰基肽,和脂多糖导致快速回避行为(Boillat等人的,2015年; Chiu等的。,2013; Meseguer旅馆等的。,2014; Riviere等的,2009; Tizzano等人的,2010; 杨钊和2017年)。同样,在果蝇 果蝇,嗅觉和味觉神经元已经报道了通过不同的分子机制来检测土臭味素(模具的气味),苯酚,和脂多糖,使生物体被细菌污染避免食物(Mansourian等人去了。2016; Soldano改装等的。,2016; bt365软件app )。更深入的了解病原体避免的各种机制必须针对病原体揪出保守的宿主防御反应是重要感染的可能性。

自由生活线虫 秀丽隐杆线虫 提要细菌。这种致病菌如 铜绿假单胞菌 感染并杀死 C。线虫,并且在暴露于 页。铜绿假单胞菌, C。线虫 引发先天免疫应答,其导致途径和微生物杀灭病原体回避行为的激活提高存活率,其(马丁等人的,2017年; 迈泽尔和Kim 2014; 斯太尔等的,2008; troemel等人的,2006)。的化学感受 页。铜绿假单胞菌 代谢产物吩嗪-1-甲酰胺和pyochelin已经提出负责引发的回避行为(迈泽尔等人去了。2014年)。这些代谢物激活在ASJ化学感觉神经元对的G蛋白信号传导途径那DAF-7神经调节/ TGF-β在暴露于病原体的分钟的诱导表达。然而,动物最初是朝着草坪吸引 页。铜绿假单胞菌 只有开始,避免暴晒几个小时后,病原体(迈泽尔等人去了。2014年; 辛格和aballay,第二千○一十九; Sun等的,2011)。的初始吸引力 C。线虫页。铜绿假单胞菌 通过群体感应分子酰化丝氨酸内酯的感测(介导的比尔等人的,2006; bt365软件app )。此外,在两选择偏好之间测定 大肠杆菌页。铜绿假单胞菌,天真的动物显示更高的优先 页。铜绿假单胞菌 (bt365软件app ; 张某等人,2005年)。他们唯一的改变动物的选择而走向 即大肠杆菌 劳恩斯时间暴露于两种细菌超标的4小时后(张某等人,2005年)。因此,在神经元ASJ DAF-7 / TGF-β信号传导的激活,这曝光的分钟之后发生 页。铜绿假单胞菌,并不能完全解释后来的厌恶学习对 页。铜绿假单胞菌.

在这里我们展示的化学感受 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app OCR-2OSM-9 驱动从动物的偏好变化 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌 草坪。这通过信号调制神经内分泌途径在微生物感染的看法表明了我们从肠道的调查结果。

结果

页。铜绿假单胞菌 感染引起 C。线虫 避免在吩嗪独立的方式

因为 页。铜绿假单胞菌-produced吩嗪导致神经调节DAF-7 / TGF-β在ASJ神经元对诱导(迈泽尔等人去了。2014年),我们研究了病原体回避行为的启发吩嗪的作用。 页。铜绿假单胞菌 使用充分表征的生物合成途径来产生四个不同的吩嗪(Dietrich等的,2006)(图1a)。吩嗪-1-羧酸,由产生的所有其它吩嗪的前体 页。铜绿假单胞菌中,从分支酸通过由编码的全套功能性吩嗪-1-羧酸合成酶合成 phza1-G1phza2-G2 操纵子(Dietrich等的,2006)。吩嗪-1-羧酸,可以通过其它酶改性以使1-hydroxyphenazine,吩嗪-1-羧酸酰胺,或绿脓素(图1a)。吩嗪-1-羧酸酰胺,但不是其它吩嗪,激活DAF-7 / TGF-β在神经元ASJ(表达迈泽尔等人去了。2014年)。无论我们测试的任何所产生的四个纯化吩嗪 页。铜绿假单胞菌 当添加到草坪的避免引起 即大肠杆菌。我们发现动物暴露 即大肠杆菌 含有吩嗪-1-羧酰胺,这是需要的DAF-7 / TGF-β表达的神经元中ASJ激活草坪容器(迈泽尔等人去了。2014年),并没有表现出回避行为(图1b)。此外,动物没有回避 即大肠杆菌 随着草坪加入吩嗪-1-羧酸和绿脓菌素(图1b)。相比之下,动物没有的草坪避免 即大肠杆菌 含有1- hydroxyphenazine(图1c)。

吩嗪独立启发 C。线虫 回避 页。铜绿假单胞菌 期间感染。

(A)吩嗪的合成途径 页。铜绿假单胞菌。 (B)时间N2动物的入住率当然 即大肠杆菌 含有20微克绿脓素的,吩嗪-1-羧酸酰胺,和吩嗪-1-羧酸的草坪容器。对于对照动物暴露于溶剂模拟 即大肠杆菌 草坪。 (C)时间N2动物的入住率当然 即大肠杆菌 含草坪1-hydroxyphenazine容器。对于对照动物暴露于溶剂模拟 即大肠杆菌 草坪。 (Dbt365软件app 即大肠杆菌 含有20微克吩嗪-1-羧酸(PCA),1- hydroxyphenazine(1- HPZ),绿脓素(杓),和吩嗪-1-羧酸酰胺(PCN)的草坪容器。用于控制暴露8小时,模拟溶剂中的动物 即大肠杆菌 草坪。箭头指向肠腔的边界。 (E暴露N2 8小时,动物肠道内腔的直径的)定量 即大肠杆菌 lawns containing 20 µg of different phenazines. ***p<0.001 via the t test. n.s., n上-significant。 (F动物活着的)百分比曝光后的24小时, 即大肠杆菌 lawns containing 20 µg of different phenazines. 该 bars show the means ± SD from three independent experiments. ***p<0.001 via the t test. n.s., n上-significant。 (G)N2动物对不同吩嗪合成途径的突变体代表的生存曲线 页。铜绿假单胞菌。相对于重量,N.S. p值,非显著。 (Hbt365软件app 页。铜绿假单胞菌.

我们观察到的动物喂养 即大肠杆菌 也就是说用1 - hydroxyphenazine辅以草坪,但没有其它吩嗪,表现腹胀肠腔(图1D,E)。肠道腹胀被称为引起回避行为的微生物,包括避免 即大肠杆菌 (Kumar等的,2019; 辛格和aballay,第二千○一十九)。因此,避免 即大肠杆菌 含草坪1- hydroxyphenazine容器可能由毒素引起的动物的肠胃气胀(致图1D,E)。此外,我们观察到动物喂养 即大肠杆菌 与1-草坪hydroxyphenazine补充,但不是其它吩嗪,表现为显着降低的存活(图1F)。超过50%动物喂食 即大肠杆菌 1-hydroxyphenazine含容器的草坪24小时内死亡,而在控制喂养动物 即大肠杆菌 草坪或 即大肠杆菌 劳恩斯包含在同一时间点活其他留守吩嗪(图1F)。然而, 页。铜绿假单胞菌 突变体在吩嗪生产缺乏自己的能力杀死则未受影响 C。线虫 比较了野生型 页。铜绿假单胞菌 (图1克),表明的加入1- hydroxyphenazine可以具有非生理效应。 ,此外,所有的突变体吩嗪感应的回避行为是从该不可区分所造成的野生型 页。铜绿假单胞菌 (图1H)。这些结果表明,虽然从外部加入1- hydroxyphenazine微生物行为引导学生避免,吩嗪所产生的平均量高的量 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app

页。铜绿假单胞菌诱导 DAF-7 在神经元中表达ASJ不足以引发病原体回避

C。线虫 最初朝着草坪吸引 页。铜绿假单胞菌和交互的初始阶段之后,将动物开始,以避免细菌的草坪。然而,相互作用的回避行为的诱导之前的初始相位是可变的,导致回避各种研究不同动力学(Hao等的。,2018; 希尔伯特和Kim,2017年; Ma等的,2017年; 马丁等人的,2017年; 迈泽尔等人去了。2014年; 辛格和aballay,第二千○一十九; Sun等的,2011)。很可能在动力学的变化是避免由于在生产差异 页。铜绿假单胞菌 治回避行为的因素。我们推断在不同的生长条件 页。铜绿假单胞菌 劳恩斯可能是负责回避行为差异。我们观察到,在细菌草坪的主要区别之一是在筹备潜伏期变化 页。铜绿假单胞菌 动物在暴露之前琼脂板(Hao等的。,2018; 希尔伯特和Kim,2017年; Ma等的,2017年; 迈泽尔等人去了。2014年; 辛格和aballay,第二千○一十九; Sun等的,2011)。考察无论是在培养条件的差异 页。铜绿假单胞菌 在琼脂平板上转移之前 C。线虫 可能是为了避免不同动力学的根本原因,我们改变了 页。铜绿假单胞菌 孵育时间(图2a)。该动物的回避行为加强与的潜伏期 页。铜绿假单胞菌 劳恩斯(图2b)。动物暴露 页。铜绿假单胞菌 在草坪孵育37℃,24小时,随后25℃48小时(72小时,以称为草坪)显示显着增强的回避率相比,暴露于动物 页。铜绿假单胞菌 在草坪37孵育也就是说℃下12小时(12小时,以称为草坪)(图2c)。

页。铜绿假单胞菌诱导 DAF-7 在神经元中表达ASJ不足以引起回避行为。

(A)方案获得 页。铜绿假单胞菌 与制剂不同的培养的时间和温度在SK板。 (B温育后的上的不同制剂8小时N2草坪动物)百分比占用 页。铜绿假单胞菌. The black symbols represent individual data points. 该 bars show the means ± SD from three independent experiments. ***p<0.001 via the t test。 (C)时间N2动物12的百分比占用的过程中按的草坪72小时 页。铜绿假单胞菌。 (D)时间的诱导过程 DAF-7P :: GFP 12和上的草坪72小时 页。铜绿假单胞菌。井和ASJ化学感受神经元被标记。这幅图描绘井和ASJ神经元的安排 C。线虫 头。 (E诱导的)定量 DAF-7P :: GFP ASJ化学感受神经元在12和72小时对草坪 页。铜绿假单胞菌 随着时间的推移。 S.N.,经由非显著t检验。

无论我们测试了在由于草坪通过12和72小时的动物表现出回避动力学差异可能是在诱导差异 DAF-7 在神经元中表达ASJ。我们发现,同时暴露12小时草坪动物表现出的强大的感应 DAF-7 在神经元中表达ASJ不从暴露于72米小时的草坪即动物不同(图2D,E),暴露于12小时动物表现延迟避免草坪与暴露于72场小时的草坪的动物相比(图2cbt365软件app DAF-7 在神经元中的表达无显着暴露于12米或72小时的草坪动物,使不同(图2-图1的补充)。由于诱导 DAF-7 表达在12种72小时的动物草坪ASJ神经元区分,结果表明,感应的 DAF-7 在ASJ表达可能不是回避行为的启发的唯一原因。

肠腔胀气underlies对规避行为 页。铜绿假单胞菌

bt365软件app 图1c,d),我们测试是否占腹胀可以通过暴露与那些暴露于12小时草坪相比,72小时草坪越快避免动物显示。我们发现动物暴露于表现为臃肿早在8小时肠72块小时草坪,而动物的流明暴露于12小时8种小时草坪比得上那些动物饲喂 即大肠杆菌 (图3A-C)。因为肠导致基因的诱导的腹胀是即NPR-1的神经内分泌途径的一部分(辛格和aballay,第二千○一十九),我们检查的表达水平 NPR-1, FLP-18FLP-21 基因。如图 图3D,动物暴露于72米小时的草坪,而不是12小时草坪,表现的更高的表达水平 NPR-1, FLP-18,FLP-21 比较了动物控制的基因 即大肠杆菌.

腔肠胀气underlies对规避行为 页。铜绿假单胞菌.

(Abt365软件app 即大肠杆菌 草坪,和12和72米小时的草坪 页。铜绿假单胞菌。的头部和尾部区域的代表性显微照片被示出。箭头指向肠腔的边界。 (b和c暴露N2 8小时,动物肠道内腔的直径的)定量 即大肠杆菌 草坪,和12和72米小时的草坪 页。铜绿假单胞菌 从头部(B)和尾(C) regions. ***p<0.001 和 *p<0.05 via the t test. n.s., n上-significant。 (D)N2动物的基因表达分析生长在 即大肠杆菌 直到年轻的成年阶段,然后孵育在8小时 即大肠杆菌 草坪,和12和72米小时的草坪 页。铜绿假单胞菌. 该 black symbols represent individual data points. ***p<0.001, **p<0.01和 *p<0.05 via the t test. n.s., n上-significant。 (E)时间过程控制(EV)的百分比占用率,以及 NOL -6- 72小时的RNAi上的草坪动物 页。铜绿假单胞菌。 (Fbt365软件app NOL -6- RNAi的暴露的8小时到72小时的草坪 页。铜绿假单胞菌。箭头指向肠腔的边界。 (G动物肠道内腔的直径的)定量N2上生长控制和 NOL -6- RNAi的暴露的8小时到72小时的草坪 页。铜绿假单胞菌. ***p<0.001 via the t test。 (H)时间的诱导过程 DAF-7P :: GFP 在ASJ动物的神经元生长在控制 NOL -6- RNA干扰和暴露于72米小时的草坪 页。铜绿假单胞菌。 S.N.,经由非显著t检验。

为了进一步证实肠胀气和暴露于72米小时的草坪动物的回避行为之间的关系,我们在所研究的回避在动物中缺陷 NOL -6- 基因。这表明,以往的研究RNA干扰(RNAi)介导的击倒的 NOL -6-,A核仁RNA相关蛋白,可以减少由细菌感染肠腔引起腹胀(富尔曼等人的,2009)。我们发现 NOL -6- RNAi的延迟病原体避免(图3E, 图3位数的补充1A)。动物在不足 NOL -6-,它未能避免 页。铜绿假单胞菌 在8小时(图3E),没有在相同的时间点显示出肠胀气当暴露于72场小时的草坪(图3F,克)。有了想法一致腹胀诱导病原体回避, NOL -6- RNAi的动物暴露于72种小时避免草坪 页。铜绿假单胞菌 在24小时(图3E)他们还届时展出肠胀气(图3位数的补充1B,C)。这些结果表明, NOL -6- RNAi的动物是没有缺陷的回避行为一般情况下,和延迟回避行为是由于延迟肠胀气。尽管减少的回避行为,击倒 NOL -6- bt365软件app DAF-7 在ASJ(无论是表达图3H)左右的神经元(图3,图1D补充)。总之,这些结果表明肠道的那腹胀,但不诱导 DAF-7 在ASJ神经元,伏于回避行为。

页。铜绿假单胞菌 相关因素与毒力病原体回避行为

无论我们接着测试暴露的动物的肠道气胀增强8〜72小时是因为草坪小时增加细菌定植与暴露于12小时的同时草坪动物相比。我们发现,而动物暴露12小时,有增加在肠道定植一致的草坪,暴露72小时的动物没有表现出任何的草坪在第一殖民期间增加曝光的8小时(图4a)。这些结果表明在72小时即肠胀气是独立细菌草坪定植。因此,我们调查是否对两种草坪动物的生存是不同的。暴露于72小时比草坪动物更快动物死亡显着暴露于12场小时的草坪(图4b),这表明毒力 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app

页。铜绿假单胞菌 随着毒力相关因素回避行为。

(A)时间的每暴露于12只动物的动物N2菌落形成单位(cfu)和72米小时的草坪当然 页。铜绿假单胞菌-GFP。 (B)代表于12 N2动物的存活曲线和72种小时的草坪 页。铜绿假单胞菌. p<0.0001。 (C)时间N2动物72小时的百分比占用当然对不同突变体的草坪 页。铜绿假单胞菌。 (D)的代表性显微照片 DAF-7P :: GFP bt365软件app 页。铜绿假单胞菌。这幅图描绘井和ASJ神经元的安排 C。线虫 头。 (E)的定量 DAF-7P :: GFP 在动物的ASJ化学感受神经元对暴露4小时,以不同的突变体的草坪 页。铜绿假单胞菌. ***p<0.001 via the t test. n.s., n上-significant。 (F的平均草坪占用时间)相关(吨50 入住)对应的水平 DAF-7P :: GFP 在动物的ASJ化学感受神经元对暴露于不同的 页。铜绿假单胞菌 突变体。 (G的平均草坪占用时间)相关(吨50 入住)的平均存活时间对应(T50 生存)在动物暴露于不同 页。铜绿假单胞菌 突变体。

它已经,被证明无毒力 页。铜绿假单胞菌 菌株在基因缺陷型 民航总局,基因表达和毒力的全球活化剂,不引起 C。线虫 避免(Hao等的。,2018; 辛格和aballay,第二千○一十九)。 页。民航总局铜绿假单胞菌 突变体存在也阻碍了在诱导 DAF-7 在ASJ化学感受神经元(迈泽尔等人去了。2014年)。因此,目前尚不清楚是否无力 页。民航总局铜绿假单胞菌 突变体引发的回避行为是由于减少了 DAF-7 诱导的神经元ASJ或它们降低的毒力。这两种可能性之间进行区分和测试的作用 页。铜绿假单胞菌 毒力 C。线虫 回避行为,我们测试的感应 DAF-7 在ASJ神经元和回避行为引起通过的数种菌株 页。铜绿假单胞菌 随着毒力降低。我们选择了多样化的 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app C。线虫 (Feinbaum等人的,2012)。我们证实了所有研究的 页。铜绿假单胞菌 突变毒力降低表现出野生型相比 页。铜绿假单胞菌 (图4-图1A补充)。统统这些突变体中有缺陷的启发另外的病原体回避行为(图4c)。我们接下来测试的感应 DAF-7 :: GFP 在暴露后ASJ神经上述 页。铜绿假单胞菌 突变体。我们发现,而 kinbRHLR bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app DAF-7 在ASJ神经元,诱导 DAF-7 通过 LASR, lysC的,PTSP bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 (图4D,Ebt365软件app DAF-7 在神经元中表达也由所有的这些 页。铜绿假单胞菌 突变体与野生型诱导区分 页。铜绿假单胞菌 (图4-图1b中的补充)。水平 DAF-7 感应由不同引起的神经元ASJ 页。铜绿假单胞菌 突变体并没有显示出与动物的平均占用任何关联 页。铜绿假单胞菌 草坪突变体(图4Fbt365软件app 页。铜绿假单胞菌 突变体表现出很强的相关性随着动物的平均入住 页。铜绿假单胞菌 草坪突变体(图4G)。加在一起,表明这些结果的毒力 页。铜绿假单胞菌,而不是诱导其能力 DAF-7 bt365软件app C。线虫 回避行为。

在aerotaxis调整对象的控制所涉及的神经内分泌信号传导联想学习的病原体行为

导致基于这一发现肠胀气所感染,而不是化学感受的 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 启用了几个小时 C。线虫 优先选择非致病性 即大肠杆菌 过度 页。铜绿假单胞菌 (张某等人,2005年)。同样地,在两个选择试验,当幼稚的动物分别给予之间的选择 即大肠杆菌页。铜绿假单胞菌,动物改变自己的喜好从 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌 曝光后的8小时(图5a,5b中)。该 页。铜绿假单胞菌 选择指数(CI),在描述 图5a,动物的喜好措施 页。铜绿假单胞菌 值的范围从-1到1的值1,-1和0表示所有的动物都在 页。铜绿假单胞菌,所有的动物都远离 页。铜绿假单胞菌和动物的数量相等是 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌分别。由于aerotaxis起着避免病原体的作用(迈泽尔等人去了。2014年; Reddy等的,2009; 辛格和aballay,第二千○一十九; 斯太尔等的,2008),我们调查是否aerotaxis也是从致病的非致病细菌在偏好的变化重要。

在aerotaxis调整对象的控制所涉及的神经内分泌信号传导联想学习的病原体行为。

(A二选择偏好测定的)示意图。动物转移到板的中心从草坪等距离 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。动物对两种草坪数量在同一时间进行计数和用于计算给定的 页。铜绿假单胞菌 选择指数(CI)。 (B)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定动物的CI N2 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。 (C)的代表性显微照片 CYSL-2P :: GFP - 表达动物暴露24小时以 即大肠杆菌页。铜绿假单胞菌 草坪。 (D)的定量 CYSL-2P :: GFP 在动物水平暴露24小时, 即大肠杆菌页。铜绿假单胞菌 bt365软件app The quantification was conducted using a COPAS Biosort machine to measure the mean GFP signal and the length of individual animals. The GFP signal of each animal was normalized 至 its length. 该 data are plotted as a box 和 whisker plot from 过度 100 animals f要么 each conditi上. ***p<0.001 via the t test。 (E)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 N2的词和 DAF-7(ok3125) 动物在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。 (F)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 N2的词和 NPR-1(ad609) 动物在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。 (G)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 N2的词和 DAF-7(ok3125)NPR-1(ad609) 动物在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌.

如果我们理性的动物感受到不同的细菌的草坪不同程度的缺氧,aerotaxis调节途径可能会影响微生物的偏好。据了解, 页。铜绿假单胞菌 草坪比低氧气水平 即大肠杆菌 劳恩斯(格雷等人的,2004; Reddy等的,2011)。要确定是否对动物 即大肠杆菌页。铜绿假单胞菌 应对不同层次的两种草坪的氧气,我们使用了 CYSL-2P :: GFP 记者应变。该基因的表达 CYSL-2 通过调节缺氧诱导因子1(HIF-1),通过转录诱导因子即低水平的氧气(Ma等的,2012)。由于HIF-1在较高的和较低的氧水平积聚被降解(Jiang等的,2001),的表达水平 CYSL-2 由动物所经历的负相关的氧气水平。我们发现暴露24小时,动物 页。铜绿假单胞菌 劳恩斯GFP更高水平对比较了那些接触 即大肠杆菌 劳恩斯(图5c,D)。

我们观察到的功能突变的损失 DAF-7NPR-1,这是在DAF-7 / TGF-β,和NPR-1信号不足,分别抑制了病原体避免(图5位数的补充1A,B)和优先的变化 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌 (图5E,F)。这两种神经内分泌途径被称为并行采取行动(昌等人的,2006; 奖金等人的,2002);因此,我们研究的行为 DAF-7(ok3125)NPR-1(ad609) 动物。我们发现,在上述表型增强 DAF-7(ok3125)NPR-1(ad609) 动物(图5G, 图5,图1C补充)。合在一起,这些结果表明,aerotaxis调节途径都需要在微生物病原体感染优先的变化。

遗传相互作用偏爱氧气在被定性以及 C。线虫 (昌等人的,2006; 昌和巴格曼,2008年)。功能丧失增加偏爱低氧 NPR-1DAF-7 突变体需要瞬时受体电位香草通道的功能(TRPV)基因 OSM-9OCR-2 (昌等人的,2006)。由于功能丧失 OCR-2OSM-9 突变体对高氧含量增加的偏好(昌等人的,2006),而且由于 即大肠杆菌 有无草坪relativamente更高的氧含量(格雷等人的,2004; Reddy等的,2011),我们推断这些突变体应改变自己的偏好迅速 即大肠杆菌 如果可以选择,如果之间 即大肠杆菌页。铜绿假单胞菌bt365软件app OCR-2(AK47)OSM-9(yz6) 表现出增强的回避 页。铜绿假单胞菌 草坪。正如所料, OCR-2(AK47)OSM-9(yz6) 动物表现的回避行为有力的提升(bt365软件app , 图6位数的补充1A)。这些动物也表现出偏好的迅速变化 即大肠杆菌 bt365软件app 图6B, 图6-图1b的补充)。偏好在高氧 OCR-2(AK47)OSM-9(yz6) 突变体是由功能突变的损失抑制 EGL-9HIF-1的负调节剂(昌和巴格曼,2008年)。一致EGL-9的功能,我们观察到, EGL-9 两个突变抑制增强的病原体避免和 即大肠杆菌 偏好 OSM-9(yz6) 动物(图6C,d)。这些结果表明,调节这两个aerotaxis 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app

行为的调制通过肠胃气胀underlies aerotaxis在微生物感染优先的变化。

(A)时间n2的%的入住当然和 OSM-9(yz6) bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 草坪。 (B)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 N2的词和 OSM-9(yz6) 动物在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。 (C)时间的百分比占用的过程 OSM-9(yz6), OSM-9(yz6); EGL-9(sa307)EGL-9(sa307) bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 草坪。 (D)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 的词 OSM-9(yz6), OSM-9(yz6); EGL-9(sa307)EGL-9(sa307) 动物在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。 (E)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 生长在RNA干扰细菌的动物词N2控制以及RNAi的抗细菌 AEX-5EGL-8 在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。 EV,RNAi的空载体对照。 (F)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 N2的词, bt365软件app EGL-8(n488) 动物在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。 (G)时间的过程 页。铜绿假单胞菌 动物词N2生长在 NOL -6- RNAi的以及监测细菌在含有一种草坪每个容器的两选择偏好测定 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌。 EV,RNAi的空载体对照。

通过激活肠aerotaxis腹胀控制在微生物感染途径优先的变化

而上述结果表明,厌恶学习和微生物途径的改变需要aerotaxis偏好,它们不提供见解的信令过程中的微生物感染,导致微生物偏好的变化。在病原体感染肠腔的腹胀激活的NPR-1 / GPCR和DAF-7 / TGF-β途径,这导致在朝向高氧的偏好(辛格和aballay,第二千○一十九)。因此,我们推断与臃肿的肠子的动物,应该表现出更加快速的学习和变革优先于 即大肠杆菌 在两选择测定。我们研究了变化,从偏爱 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌 在的两个选择测定 AEX-5EGL-8 敲除动物。这些基因敲除引起的肠腔胀气,导致增强回避 页。铜绿假单胞菌 (辛格和aballay,第二千○一十九)。如图 图6E,F,这些基因通过RNAi和突变的抑制当前形势引起以优先于快速变化 即大肠杆菌 劳恩斯在两个选择试验。我们能够引发也迅速朝偏好 即大肠杆菌 bt365软件app 图6-图2补充)。暴露在氧气含量低本身并不会影响肠道细菌定植无论是或腹胀(图6-图3补充)。

由于通胀加速动物朝着偏好 即大肠杆菌, 我们预测的动物,抗感染,也不会是细菌偏好变化的能力腹胀。我们研究了在偏好微生物变化 NOL -6- 这RNA干扰动物对耐 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app 图6G, NOL -6- 动物的RNAi缺陷的厌恶学习走向 页。铜绿假单胞菌。总之,这些结果表明,肠胀气由病原体感染引起的,其中调制aerotaxis调节神经内分泌途径,是学习过程的重要,导致从含有相对较低包含那些水平较高的氧气瓶菌苔微生物偏好的变化。

讨论

这项研究我们的肠道感染建立和腔道,依赖于毒力的腹胀 页。铜绿假单胞菌,通过调节神经内分泌途径NPR-1 / GPCR和DAF-7 / TGF-β双向调节病原体避免和厌恶学习也就是说aerotaxis控制行为(图7)。这些增强的途径的活动,肠道感染的结果,导致避免低的氧,在避免由于微生物代谢细菌草坪和低的氧而产生的。肠道感染介导的回避低氧而且动物的驱动器从所述移动 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌 草坪,已报告有相对较高的氧含量。因此,神经内分泌途径的调制aerotaxis调节肠道感染在学习过程中起到了重要作用,在动物来自偏好变化导致的 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌 (图7)。也预示着我们的学习感知受到微生物的投入从肠道的控制。在感染 C。线虫.

型号为肠道微生物感染调节的感知。

快速化学感受 页。铜绿假单胞菌 导致诱导 DAF-7 在所述一对神经元ASJ表达不足以引起逃避行为。肠道感染导致腹胀激活NPR-1 / GPCR和DAF-7 / TGF-β的神经内分泌途径,驱动低的抽空或2 页。铜绿假单胞菌 草坪和在从relativamente偏好改变下或2 草坪的 页。铜绿假单胞菌 相对较高或2 草坪的 即大肠杆菌.

页。铜绿假单胞菌 次级代谢产物,包括吩嗪-1-羧酰胺,已显示激活DAF-7 / TGF-β途径的化学感觉神经元ASJ对(迈泽尔等人去了。2014年)。然而,我们发现,吩嗪-1-羧酸酰胺不回避行为的启发发挥作用(图1b中,h)。 DAF-7的感应/ TGF-β在化学感受神经元中观察到ASJ内6分钟暴露于 页。铜绿假单胞菌和没有进一步的变化,观察到高达24小时(迈泽尔等人去了。2014年)。然而,回避行为才能观察到的交互作用的小时后, 页。铜绿假单胞菌。因此,当活性DAF-7 / TGF-β途径是必需的以引起回避行为(图5位数的补充1A),在神经元中由化学感受ITS ASJ快速激活似乎不足以的ESTA行为诱导。因为DAF-7 / TGF-β和NPR-1 / GPCR途径通过肠胃气胀诱导(辛格和aballay,第二千○一十九)和协同作用引起病原体避免(图5G, 图5,图1C补充),很可能整合多种输入,动物,包括肠道感染,化学感受,诱导防御反应。的确,除了或2,感合动物2 而不是从经由多个化学感受神经元细菌草坪控制病原体回避行为(勃兰特和Ringstad,2015年; Hao等的。,2018)。

C。线虫 拥有一种与生俱来的吸引力的气味 页。铜绿假单胞菌, 和短暂接触 页。铜绿假单胞菌 不会导致偏好的变化 即大肠杆菌 (bt365软件app ; 张某等人,2005年)。由于嗅觉厌恶学习 页。铜绿假单胞菌 和改变优先于 即大肠杆菌 需要几个小时暴露于 页。铜绿假单胞菌,由动物学会避免病原体随时间的机制仍不清楚。在这里我们展示腹胀所致肠 页。铜绿假单胞菌 感染是必需的学习过程。我们证明包括通过肠胀气学习aerotaxis调节神经内分泌途径的调节。通过动物行为的基因调节aerotaxis,我们能够诱导急剧变化,从偏爱 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌.

几个致病喂养,但不是非致病细菌定植并导致肠胀气(富尔曼等人的,2009; bt365软件app ; Kurz等的,2003; 源和Ausubel,2018)。因此,防御腹胀引起的反应可能是一个广义响应 C。线虫 由不同的病原体和感染启用动物病原微生物和无害之间进行区分。事实上,通过遗传操作肠胀气的感应激活朝向非致病细菌甚至回避行为(Kumar等的,2019; 辛格和aballay,第二千○一十九)。有趣的是,神经肽Y(NPY)相关的信号传导途径的神经内分泌NPR-1,其通过肠胃气胀在激活 C。线虫,看上去有活化和作用的保守模式跨越各种不同的物种的(杜瓦尔等人的,2019; 辛格和aballay,2019bbt365软件app 辛格和aballay,2019b)。这将是有趣的研究,肠胀气是一个危险的信号保守的激活在不同物种的免疫反应。

bt365软件app C。线虫 具有有节奏的排便即周期被定时通过在肠pH的振荡(Pfeiffer等的,2008)。在波的pH引线缺陷在排便周期引起肠胀气缺陷(Pfeiffer等的,2008)。这种致病菌如 页。铜绿假单胞菌粪肠球菌,但不是非致病性 即大肠杆菌bt365软件app C。线虫 肠(Benomar等人的,2018)。这有可能是这种干扰pH值波的病原体,导致肠胀气的 C。线虫。然而,仍有待确定致病细菌如何扰乱酸碱度波。仅在肠腔和其他可能的机制细菌的复制可能导致肠胀气存在。

越来越多的证据表明, C。线虫 识别通过感测扰动动态平衡,包括蜂窝芯procesos的扰动,DNA损伤的潜在病原体攻击,和肠胃气胀(邓巴等人的,2012; Ermolaeva等人的,2013; Kumar等的,2019; 麦克尤恩等人的,2012; 梅洛和Ruvkun,2012; 普基拉 - 沃利年,2016年; 辛格和aballay,第二千○一十九)。因此,这些研究表明,病原体感染或毒素引起的生理变化产生在修改 C。线虫 即稳态诱发神经内分泌经由信令厌恶先天免疫应答和微生物行为。它仍有待确定是否 C。线虫 能够当前通过更传统的像能够机制的那些微生物相关的分子识别图案(毫安)的确认感染微生物。 C。线虫 坐骑的免疫反应走向致病热灭活的细菌(普基拉 - 沃利和Ausubel,2012; 源和Ausubel,2018),表明MAMP状机构可能存在。然而,结果的解释并不简单这些热灭活的细菌由于可能导致肠胀气和防御反应的激活(辛格和aballay,第二千○一十九)。

我们的研究表明的这化学感受 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app C。线虫,是针对病原体不足回避行为的启发。我们不能排除这种可能性,其他代谢物或毒力因子发挥病原体回避的启发作用。我们的研究结果表明肠胀气由微生物引起的感染起到学习和病原微生物厌恶偏好至关重要的作用 页。铜绿假单胞菌 以非致病性 即大肠杆菌。在最近的研究 果蝇 还强调在调节免疫反应和社会行为肠道感染的作用(bt365软件app )。因此,行为由肠道感染出现的调制跨物种保守。未来的研究进一步破译这些保守的途径将更好地了解肠道微生态失调感染和肠道介导的行为和生理上的变化帮助。

材料和方法

关键资源表
试剂类型
bt365软件app
指定源或参考身份标识额外
信息
应变,应变背景(大肠杆菌)OP50bt365软件app
遗传学中心(CGC)
OP50
应变,应变背景(即大肠杆菌)HT115生物科学源HT115
应变,应变背景(即大肠杆菌)DH5-GFP弗雷德里克·奥苏贝尔实验室米DH5-GFP
应变,应变背景(铜绿假单胞菌)PA14弗雷德里克·奥苏贝尔实验室米PA14
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14-GFP弗雷德里克·奥苏贝尔实验室米PA14-GFP
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14 kinb德博拉·鸿实验室PA14 kinb
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14 LASR德博拉·鸿实验室PA14 LASR
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14型lysC贾森·帕潘实验室PA14型lysC
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14 RHLR托马斯ķ木材实验室PA14 RHLR
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14 PHZ拉尔斯·迪特里希实验室PA14 PHZ两者都不具备phza1-G1和G2 phza2,操纵子
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14的phzH拉尔斯·迪特里希实验室PA14的phzH
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14 PHZm拉尔斯·迪特里希实验室PA14 PHZm
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14 PHZs拉尔斯·迪特里希实验室PA14 PHZs
应变,应变背景(页。铜绿假单胞菌)PA14 PTSP库恩目标实验室PA14 PTSP
应变,应变背景(秀丽隐杆线虫)N2布里斯托尔CGCN2
应变,应变背景(C。线虫)ksis2 [DAF-7P :: GFP + ROL-6(su1006)]CGCfk181
应变,应变背景(C。线虫)nis470 [CYSL-2P :: GFP +肌肉2P ::的mCherry]CGCdms640
应变,应变背景(C。线虫)OCR-2(AK47)CGCcx4544
应变,应变背景(C。线虫)OSM-9(yz6)CGCjy190
应变,应变背景(C。线虫)bt365软件app CGCjt23
应变,应变背景(C。线虫)EGL-8(n488)CGCmt1083
应变,应变背景(C。线虫)EGL-9(sa307)CGCjt307
应变,应变背景(C。线虫)NPR-1(ad609)CGCda609
应变,应变背景(C。线虫)DAF-7(ok3125)CGCrb2302
应变,应变背景(C。线虫)OSM-9(yz6); EGL-9(sa307)这项研究材料和方法部分
应变,应变背景(C。线虫)DAF-7(ok3125)NPR-1(ad609)这项研究材料和方法部分
软件,算法的GraphPad Prism 8bt365软件app rrid:scr_002798//www.graphpad.com/scientificsoftware/prism/
软件,算法Pho至shop CS5的土砖rrid:scr_014199//www.adobe.com/products/pho至shop.html
软件,算法ImageJ的美国国立卫生研究院rrid:scr_003070//imagej.nih.gov/ij/
软件,算法徕卡V4.6莱卡rrid:scr_013673//www.leica-microsystems.com/
其他bt365软件app 干细胞技术猫#27310//www.stemcell.com/products/hypoxia-incuba至r-chamber.html

细菌菌株

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以下细菌菌株用于: 大肠杆菌 OP50, 即大肠杆菌 HT115(DE3) 即大肠杆菌 DH5-GFP, 铜绿假单胞菌 bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 PA14-GFP, 页。铜绿假单胞菌 PA14 δkinb, 页。铜绿假单胞菌 PA14 δlasr, 页。铜绿假单胞菌 PA14 δlysc, 页。铜绿假单胞菌 PA14 δrhlr, 页。铜绿假单胞菌 PA14 δphz (缺乏无论是 phza1-G1phza2-G2 操纵子) 页。铜绿假单胞菌 PA14 δphzh, 页。铜绿假单胞菌 PA14 δphzm, 页。铜绿假单胞菌 PA14 δphzs页。铜绿假单胞菌 PA14 δptsp。这些细菌在生长的培养物的Luria-BERTANI(LB)肉汤,在37℃。

C。线虫 菌株和生长条件

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C。线虫 维持对雌雄同体 即大肠杆菌 OP50在20℃,除非另有说明。布里斯托尔用作N2野生型,除非另有说明控制。 fk181株 ksis2 [DAF-7P :: GFP + ROL-6(su1006)],dms640 nis470 [CYSL-2P :: GFP +肌肉2P ::的mCherry],cx4544 OCR-2(AK47),jy190 OSM-9(yz6),jt23 bt365软件app ,mt1083 EGL-8(n488),jt307 EGL-9(sa307),da609 NPR-1(ad609)和rb2302 DAF-7(ok3125) 从线虫遗传中心(明尼苏达大学,明尼阿波利斯,MN)获得。该 OSM-9(yz6); EGL-9(sa307)DAF-7(ok3125)NPR-1(ad609) 双突变体通过标准遗传杂交获得。该 DAF-7(ok3125)和DAF-7(ok3125)NPR-1(ad609) 维持对雌雄同体 即大肠杆菌 OP50在15℃。

RNA干扰(RNAi)

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的RNAi用于产生失功能表型通过RNAi馈送线虫 即大肠杆菌 应变HT115(DE3)中表达双链RNA(dsRNA的)同源的靶基因(所述Fraser等人,2000; 蒂蒙斯和火,1998年)。 RNA干扰进行如先前所描述(辛格和aballay,2017年)。简单地说, 即大肠杆菌 与适当的载体在LB肉汤容器生长在含有氨苄青霉素(100微克/ ml)和四环素(12.5微克/毫升)在37℃下过夜,并铺板于含有100微克/ ml氨苄青霉素和3mm异丙基β-d硫代半乳糖苷NGM板容器(IPTG)(RNAi的平板)。 RNAi的表达使其生长过夜的细菌在37℃。转移到妊娠成虫的RNAi表达细菌草坪和使其产卵2小时。物的妊娠成人移除,并且鸡蛋被允许在20℃下发展到年轻成人为随后的测定。从库中的RNAi Ahringer RNA干扰克隆。

页。铜绿假单胞菌 草坪试验回避

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bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 在草坪37孵育时获得°被用于测定,除非另有说明回避下进行12小时。三十年轻的成年妊娠同步雌雄同体的动物,生长在 即大肠杆菌 HT115(DE3)或含有RNAi载体对照克隆的基因靶向物转移所指示菌苔外容器中,并且打开和关闭所述的草坪动物的数量在每个实验指定的时间进行计数。 3个3.5厘米直径的板在每一个实验每次试验使用。进行的实验中,在25℃下进行百分比占用被计算为(N 草坪/ N)×100。至少有三个独立的实验进行。

即大肠杆菌 bt365软件app

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即大肠杆菌 OP50培养接种细菌生长的单个菌落到10ml液体培养基中,生长他们磅,在37℃下在振荡器上10-12小时。被培养10-20倍浓缩,和20微升涂布到厘米直径的3.5的琼脂平板的中央,并在修改的37 NGM孵育℃下12小时。不同吩嗪的储备溶液,将其在乙醇中制备的,要么稀释至10或20mg在M9盐溶液,以20微升的体积端,并加入到 即大肠杆菌 草坪。用于控制板,乙醇的等量混合随着M9盐溶液,并加入到 即大肠杆菌 草坪。这些板在室温下温育然后在接种随着妊娠20年轻成年同步雌雄同体动物前30分钟的温度。进行的实验中,在25℃下进行百分比占用被计算为(N 草坪/ N)×100。至少有三个独立的实验进行。

二选择测定偏好

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页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌 通过接种培养物中生长HT115属于个人的细菌菌落于2ml和10ml LB肉汤,分别的,并在37℃下在振荡器上生长他们10-12小时。 即大肠杆菌 接种在平板上之前,HT115浓缩培养物20倍10。然后,将20微升的每个接种物铺板于3.5对角线相对厘米直径的平板上,在SK 37℃温育12小时。用动物接种之前冷却至室温30分钟,至少所述板。三十年轻的成年妊娠同步雌雄同体的动物,生长在 即大肠杆菌 含有RNAi载体对照克隆或基因打靶HT115(DE3)容器转移至板的中心从草坪两个等距。在5%氧气的实验中,将含有缺氧室中的容器在25升/分钟的流速吹扫用5%氧(氮平衡)为5分钟的板。然后将腔室密封,并在25℃下培养用于控制的两选择测定板在室温下温育氧。动物的数量在每个实验指定的时间进行计数两个草坪。 3个3.5厘米直径的板在每一个实验每次试验使用。为实验在25℃下进行。该 页。铜绿假单胞菌 选择指数(页。铜绿假单胞菌 CI)的计算如下:

P. aeruginosa CI=[No. of worms on P. aeruginosa-No. of worms on E. coli][No. of worms on P. aeruginosa+No. of worms on E. coli]

至少有三个独立的实验进行。

腹胀和肠道定殖测定法中以8%的氧

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即大肠杆菌 通过接种细菌生长DH5-GFP的培养物的单个菌落入25mL LB肉汤容器的含有氨苄青霉素(100微克/毫升),在37℃下在振荡器上生长他们10-12小时。被培养10-20倍浓缩,和300微升接种到厘米直径6的中心琼脂平板NGM含有氨苄青霉素容器(100微克/ ml)和温育在25℃下48小时。第五年轻的成年妊娠同步雌雄同体的动物转移到n2包含容器板 即大肠杆菌 DH5-GFP的草坪。然后将板置于低氧室和所述板的盖被去除。然后缺氧室中充入8%的氧气(其余为氮气),用于在25升/分钟的流速5分钟。然后将腔室密封,并在25℃温育24小时。控制所述板在环境氧中温育。在孵育24小时后,将动物用于细菌定植和成像肠腔直径定量。

C。线虫 在杀伤测定法 铜绿假单胞菌 PA14

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C。线虫 进行了杀伤测定法对野生型 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 PA14生长在37℃的变体C为厘米直径的3.5板SK的整个表面上扩散。分别将平板在37℃温育12小时,然后冷却至室温至少播种随着妊娠成年青年同步雌雄同体动物之前30分钟。分别的杀伤测定法,在25进行℃,活的动物每天转移至新鲜平板。动物的时间进行评分,并视为死亡时表示他们没有响应触摸。随着杀伤测定法不同 页。铜绿假单胞菌 PA14突变体上满草坪开展。

肠道细菌负荷的定量

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肠细菌负荷如所描述的量化以前被(辛格和aballay,第二千○一十九)。简单地说, 页。铜绿假单胞菌草坪-GFP制备如上所述。用年轻成年妊娠动物雌雄同体播种之前冷却至室温30分钟,至少所述板。物测定法在25℃下进行在曝光时间表示,将动物转自 页。铜绿假单胞菌-GFP板,以新鲜的中心 即大肠杆菌 板10分钟,以除去尽可能 页。铜绿假单胞菌他们的身体坚持-GFP。动物转移到一个新的中心 即大肠杆菌 板10分钟,以进一步除去作为外部 页。铜绿假单胞菌-GFP。动物转移到新鲜 即大肠杆菌 板,以第三时间为10分钟。随后,10只动物/状态转移到50微升的PBS加0.01%的Tri至n X-100和地。裂解物的系列稀释液(101,102,103,104)接种到含有50磅的板容器微克/ ml卡那霉素的选择用于 页。铜绿假单胞菌-GFP细胞中并在37℃生长过夜。计数单菌落第二天和为代表的细菌细胞或每个动物的cfu的数目。对于每种条件下进行三个独立的实验。

DAF-7P :: GFP 诱导测定

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以测量的诱导 DAF-7P :: GFP 在阱和ASJ神经元对,12小时(在37℃下温育12小时)或72小时(在37℃下温育24小时,随后25℃下48小时)的野生型的草坪 页。铜绿假单胞菌 是PA14使用。是如上所述制备的菌苔。分别将板冷却至室温30分钟,至少播种前用 DAF-7P :: GFP 年轻的记者妊娠成人雌雄同体的动物。这些板在25℃温育指定的时间,然后将动物用于荧光成像来制备。以测量的诱导 DAF-7P :: GFP 暴露于不同 页。铜绿假单胞菌 PA14突变体,细菌草坪制备孵育为37℃持续12小时。妊娠年轻成人雌雄同体 DAF-7P :: GFP bt365软件app

荧光成像

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荧光成像进行如先前所描述(辛格和aballay,2017年)略有修改。简要地,将动物用含有50mM叠氮化钠和2%琼脂的M9盐溶液容器安装到焊盘麻醉。然后将动物使用莱卡 M165 FC荧光体视显微镜观察。

肠腔胀气的量化

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处理指示的后,将动物用含有50mM叠氮化钠的M9盐溶液容器麻醉,2%琼脂安装到焊盘,并成像。肠腔的直径使用徕卡的V4.6软件来测量。至少10只动物用于每个条件。

CYSL-2P :: GFP 诱导测定

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妊娠年轻的成年同步雌雄同体 CYSL-2P :: GFP 动物生长在 即大肠杆菌 转移到HT115 即大肠杆菌 HT115和 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌 通过接种培养物中生长HT115属于个人的细菌菌落于2ml和10ml LB肉汤,分别的,并在37℃下生长他们8至10小时在振荡器上。 即大肠杆菌 bt365软件app 页。铜绿假单胞菌20微升接种物扩散到完全覆盖厘米直径的3.5的表面板SK。分别将平板在37℃温育12小时,然后冷却至室温30分钟,至少播种随着妊娠成年青年同步雌雄同体之前 CYSL-2P :: GFP 动物。眼镜bios要么t机(biometrica联盟)来测量的飞行(长度)和荧光单个蠕虫的时间。对于每种条件至少100个蠕虫进行测定。

RNA分离和定量逆转录PCR(QRT-PCR)

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动物的产卵同步。大约35妊娠成年动物在N 2转移到接种了RNAi的10厘米板 即大肠杆菌 HT115并使其产卵4小时。然后,妊娠成年人中去除,且将卵在20到开发℃。动物们生长在 即大肠杆菌 在20℃下HT115板直到年轻的成年阶段。随后,将动物转移至厘米直径的3.5板接种SK随着20微升的 页。铜绿假单胞菌 在37℃下具有12小时以上37℃和预温育24小时,随后25℃48小时。在对照动物维持 即大肠杆菌 HT115。动物的转印后,将平板在25℃温育8小时。随后,对动物进行收集,用M9缓冲液中,在Trizol试剂冷冻(Life Technologies公司,卡尔斯巴德,CA)。总RNA使用RNeasy加提取的通用试剂盒(Qiagen,USA)。使用涡轮DNA酶(生命技术公司,卡尔斯巴德,CA)除去剩余的基因组DNA。 6克总RNA的总逆转录随着使用高容量cDNA逆转录试剂盒(Applied Biosystems公司,福斯特城,CA)随机引物。

QRT-PCR在96孔板格式在Applied Biosystems 7900HT实时PCR机器上使用一步骤Applied Biosystems公司的实时使用SYBR绿色荧光协议PCR(Applied Biosystems)上进行。二十五个微升反应进行分析由生产商(Applied Biosystems)中所概述的。该转录物的相对倍数变化用比较计算 CT(2bt365软件app CT)的方法和标准化为泛肌动蛋白(ACT-1,-3,-4)。扩增循环的阈值使用StepOnePlus扩增软件(Applied Biosystems)测定。一式三份运行所有样品。第一序列已之前描述(辛格和aballay,第二千○一十九)。

量化和统计分析

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The statistical analysis was performed with Prism 8 (GraphPad)。 All error bars represent the standard deviation (SD)。该 two-sample t test was used when needed, 和 the data were judged to be statistically significant when p<0.05. In the figures, asterisks (*) denote statistical significance as follows: *, p<0.05, **, p<0.001, ***, p<0.0001, as compared with the appropriate controls. 该 Kaplan-Meier method was used 至 calculate the survival fracti上s和 statistical significance between survival curves was determined using the log-rank test. All experiments were perf要么med in triplicate.

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  48. 48
  49. 49
  50. 50
  51. 51
  52. 52
    bt365软件app
    1. NJ阳
    2. IM钊
    (2017)
    分子生物学杂志 429:587-605。
    //doi.要么g/10.1016/j.jmb.2016.12.023
  53. 53
  54. 54

决定书

  1. 饭野雄一
    回顾编辑;日本东京大学
  2. ķvijayraghavan
    高级编辑;国首页生物科学中心,基础研究Tata学院,印度
  3. 哈维尔伊拉奥基
    评论首页

在透明度,澳门赌场网站,出版了最实质审查请求,并伴随着作者的答复。

验收总结:

bt365软件app DAF-7 在ASJ感觉神经元在传输病原体信息产生病原体回避行为的重要作用,作者展示正因为如此表达 DAF-7 bt365软件app 澳门赌场网站.

经过同行评议的信决定:

感谢您的文章提交“调控肠道感染的行为和神经内分泌通过学习信号”通过审议 澳门赌场网站。您的文章,被三个审稿审议,并evaluati上've通过审查编辑和K vijayraghavan作为资深编辑去过监督。在您提交的以下审查所涉及的个人同意透露自己的身份:哈维尔伊拉奥基(评审#1)。

评论首页都彼此讨论的回顾和检讨编辑起草这一决定,以帮助您准备一份修改稿。

所有三个审稿欣赏的重要性的工作,特别是因为它挑战的主要作用的普遍看法 DAF-7 在发送用于产生pathgen回避行为的病原体信息ASJ。然而,同意,他们也有一些作者的断言还有待于进一步证实。因此,我们邀请的稿件评审,并作为评审的共识,我们要求在审查加以解决以下。

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1)作者似乎声称病原体回避行为是由aerotaxis在本手稿驱动(至少所以它听起来)。然而,真的是这样吗aerotaxis导致的偏好 即大肠杆菌 在致病细菌接触后致病?作者的要求主要是基于这样的事实的那草坪 页。铜绿假单胞菌 具有比低氧气水平 即大肠杆菌bt365软件app NPR-1,OCR-2OSM-9 为避免和抑制由 EGL-9。然而,其他规范这些途径以及功能。要么我们要求作者考死细菌不能不管原因回避行为,或执行行为测试直接aerotaxis检测。另一种选择是削弱声称它是aerotaxis。

2)通过RNAi的遗传需求评定 bt365软件app EGL-8。因为RNAi的并不总是产生与靶基因的特异性和完全丧失,以及可用于突变体,因为所有这些基因,结果需要通过使用相应的突变体进行备份。

3)以下的点是不是绝对的要求,但它会很高兴加入:本研究表明,有趣的增加ASJ表达 DAF-7 由于没有相关性避免草坪。因为ESTA的发现将是场非常重要的,这将是有用的,以提供一个更全面的分析 DAF-7 通过包括所谓的表达 DAF-7,因为迈泽尔等的。这表明 DAF-7 在草坪也救所以回避的缺陷 DAF-7 和的突变体的表达 DAF-7 目前在暴露于井增加 假单胞菌.

评审#1:

在这个非常有趣的论文,辛格和aballay解决在通用和先天免疫的核心问题 C。线虫 特别是在先天免疫:如何感染检测和体内宿主防御机制参与?范式在这个手稿是 C。线虫 厌恶学习,在这种行为的先天免疫在感染激活,从而动物可以避开这种不利的(病原)环境。的测定是很简单的:在一种情况下(草坪测定),将动物暴露于刺激(化学,细菌)的细菌的草坪,然后他们的偏好停留在草坪上(和,因此,进料)或避免它( ,因此,逃生感染)进行测量随着时间的推移。在另一种情况下(选择测定),动物饲养在非致病性 即大肠杆菌 如果可以选择的是继续吃 即大肠杆菌 或对“美味”进料 假单胞菌 绿脓杆菌 - 哪些是致病的。

bt365软件app DAF-7 在神经元中表达ASJ。 ESTA结果是极其重要的领域,因为许多研究人员都表示怀疑关于表达了这样一个简单的模型,并与从实验室奥苏贝尔以前的研究相一致,即表明吩嗪突变 页。铜绿假单胞菌 只是作为有毒野生型(在本研究中复制)。

然后,研究人员着手确定真正触发避险情绪感染过程中。首先,他们发现的是,“老”坚实的文化 页。铜绿假单胞菌 比“年轻”的人更致命。他们将建立相关因素肠毒力腹胀,或“腹胀”。他们在开发小区图纸发布今年早些时候开创性的工作,他们发现,越老越致病 假单胞菌 肠源性神经肽比年轻的诱导更强烈,并且需要在草坪上试验厌恶学习肠臌胀。然后,他们展示的这无毒突变 假单胞菌在由奥苏贝尔实验室全基因组筛选鉴定,是由同一检测诱导厌恶学习缺陷。在吩嗪指甲/DAF-7 棺材在图4F,G,在那里他们表现出完全缺乏之间的相关介绍 DAF-7 ASJ表达和厌恶学习,但几乎完全相关用 假单胞菌 bt365软件app 即大肠杆菌 那么“好吃”比 假单胞菌尽管毒力?为什么这样选择关于反转后的12个小时?回答第一个问题,他们研究aerotaxis。随着观念相一致(与以前的研究)这 假单胞菌 草坪氧表现出较低的电压(由野生型优选 C。线虫)比 即大肠杆菌 的,他们只在动物饲养上发现HIF-1靶基因的诱导 假单胞菌,不 即大肠杆菌。然后,他们研究的突变体。 DAF-7 显示出没有选择突变体; NPR-1 他们的选择转化突变体比野生型更慢。双突变体显示出累加效应。重要的是,它们也显示扩张性 NOL -6- RNAi的蠕虫病毒也不会反转他们的选择 - 他们永远也学不会。相反, OCR-2OSM-9 突变体,其喜欢更高的氧张力,切换到自己的喜好 即大肠杆菌 并学会避免 假单胞菌 比野生型草坪更快;这是通过损失抑制 EGL-9HIF-1的负调节物。言下之意,这是不属实或测试,是HIF-1活化,从而靶基因的转录是上位到aerotaxis行为表型的损失 OCR-2 要么 OSM-9 突变体。

总之,是参与厌恶学习和食物选择在感染这纠正了在一个重要课题记录重要的研究,并确定了遗传学宿主与病原体。

评审#2:

bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 细菌 C。线虫.

他们首先测试在引发避税和增加一些吩嗪的作用 DAF-7 在ASJ表达。他们报告只有一个类型吩嗪增加 DAF-7 在ASJ表达,但它不会产生回避当放 即大肠杆菌。那他们还发现另一种类型的吩嗪排斥它不蠕虫,虽然ASJ增加的表达 DAF-7 击退吩嗪和缺乏突变体与野生型蠕虫病毒类似。这些结果表明,不需要对蠕虫的排斥吩嗪。

未来,无论是他们研究使用排斥草坪条件生长调节72小时和12小时草坪草坪。他们发现,72小时草坪强烈的排斥蠕虫引起腹胀肠但12小时草坪表现出反感虫少不会导致腹胀。同时,在72米小时的草坪,但不是12块小时草坪,类似于转录调节此外肠腹胀和减少腹胀 NOL -6- RNAi的延迟回避。同时,它们显示增强肠胀气(bt365软件app RNAi)技术增强了排斥。这些结果表明,肠胀气和草坪之间,避免强烈的联系。

终于,他们发现,有几个 页。铜绿假单胞菌 随着弱毒性突变体显示排斥蠕虫减少和变异基因aerotaxis OMS-9OCR-2改变偏好从致病开关 页。铜绿假单胞菌即大肠杆菌.

在这项研究结果证明肠胀气和草坪回避之间有很强的联系,并为蠕虫,避免传染性细菌的新机制。几个问题需要解决。

1)的结果和使用RNAi的分析应该由遗传实验的支持。

2),以往的研究表明,暴露在致病 页。铜绿假单胞菌 增加细菌的表达 DAF-7 无论是在ASJ等,并且 DAF-7 在草坪上留下解救神经元表型两种表达方式 DAF-7。这项工作同时进行测试的ASJ表达之间的关系 DAF-7 和草坪离开的行为,这将有助于在进一步的理解 DAF-7 通过检查的表达,从而起到 DAF-7.

bt365软件app DAF-7 反对由先前的研究中提供的消息(迈泽尔等的。,2014)。这是混乱的,迈泽尔等因为他。似乎没有提出的那个表达增加 DAF-7 在ASJ,诱发致病 页。铜绿假单胞菌 或吩嗪-1-甲酰胺和pyochelin,引发回避。相反,他们提出,它是对细菌感觉反应一个(例如为,他们关闭了商业,“我们的研究结果表明特定的细菌如何能对宿主的行为和生理和点效果如何次生代谢产物可作为环境线索,以贡献病原体歧视和避免“)。重要的是要弄清这些问题的读者更好地理解这个问题的复杂性。

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在“调控肠道感染的行为和神经内分泌通过学习信号”,作者展示从肠道蠕虫调节该反馈对感染的行为反应随着 铜绿假单胞菌 - 即病原体回避。响应要求 DAF-7NPR-1;其中任何一个基因的丢失你减少这两种完全阻断病原规避和损失的过程。它以前一直以为 DAF-7 bt365软件app DAF-7P :: GFP bt365软件app 页。铜绿假单胞菌bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 金额相等的原因 DAF-7P :: GFP 表达,还要激发不同级别的草坪避免。在第二示例中,蠕虫暴露于的突变体 页。铜绿假单胞菌 这改变他们如饥似渴地避免了草坪,但回避的程度不引起ASJ的水平相关 DAF-7P :: GFP 表达。相反,作者认为,肠水平腹胀由引起 页。铜绿假单胞菌 驱动病原体感染回避反应。相关的几个例子中给出。

1)吩嗪1- hydroxyphenazine是唯一的四个中的一个测试导致腹胀和避免两者。

2)72小时的草坪导致更快速的腹胀和更快速的回避。

3)的程度通过腹胀引起的不同 页。铜绿假单胞菌 突变体被关联随着回避的程度。

4) C。线虫 突变体有更多的腹胀有更多的回避,以及那些少腹胀较少回避。支撑在作者的推测,在肠中的变化(腹胀)一个相关的方式中的所有数据会导致随后的病原体回避行为。

然后,笔者认为,这是行为经了解到,硬盘病原体回避行为aerotaxis神经内分泌信号。蠕虫状细菌草坪和较少的氧和 页。铜绿假单胞菌 草坪已知有较少的氧气。然而,继NPR-1 / DAF-7神经内分泌途径上的肠道气胀和激活 页。铜绿假单胞菌,动物吃喜欢的高氧草坪 即大肠杆菌。该参数是由事实的支持突变动物 DAF-7 和/或 NPR-1 不能学会避免 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app

总体来说,这是一个非常有趣的研究,这将是广受关注的蠕虫社区。然而,我关心在其上的主要结论休息相关结果的严重依赖。

1)氧含量是真正的蠕虫学会识别为致病性草坪的标志或者是一个相关的信号?有没有办法来平衡致病性和非致病性劳恩斯之间的氧气水平?然后看看是否有人会蠕虫仍然可以学会避免草坪(如肠胀气和仍然存在(见点2))。或者,也许是动物的培训,以避免 页。铜绿假单胞菌 能够在设计,测试aerotaxis自己的喜好的分析测试?

bt365软件app 页。铜绿假单胞菌或者可能吗?或者说作者认为,高/低氧气只是虫子是如何学习的一个很好的区分(即大肠杆菌)和Bad(页。铜绿假单胞菌)草坪?

bt365软件app 页。铜绿假单胞菌 草坪已知有较少的氧气。难不成想ESTA解释了最初的吸引力的 页。铜绿假单胞菌 bt365软件app

//doi.要么g/10.7554/elife.50033.sa1

笔者响应

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1)作者似乎声称病原体回避行为是由aerotaxis在本手稿驱动(至少所以它听起来)。然而,真的是这样吗aerotaxis导致电子商务偏好。大肠杆菌致病菌过度曝光后致病?作者的要求主要是基于这样的事实P的那草坪。绿脓杆菌有比电子商务较低的氧水平。杆菌,和NPR-1的要求,OSM OCR-2和9,用于避免和抑制由EGL-​​9。然而,其他规范这些途径以及功能。要么我们要求作者考死细菌不能不管原因回避行为,或执行行为测试直接aerotaxis检测。另一种选择是削弱声称它是aerotaxis。

我们进行了额外的两个实验,研究的作用,直接在微生物偏好的变化aerotaxis和讨论的额外线索的可能性,比其他aerotaxis。如在新的数字六位数的补充2都为我们做的aerotaxis微生物偏好的变化中的作用提供了进一步的证据。修改稿写着:“我们能够引发也迅速朝偏好 即大肠杆菌 由动物暴露于5%氧气(图6-图补充2)“。

此外,我们还补充说,我们的研究并不排除的行为变化启发的额外线索的作用:“我们不能排除其他代谢物或毒力因子可能在病原体回避的启发作用。”

2)进行了评估通过RNAi的NOL-6,AEX-5和EGL-8基因的要求。因为RNAi的并不总是产生与靶基因的特异性和完全丧失,以及可用于突变体,因为所有这些基因,结果需要通过使用相应的突变体进行备份。

我们有没有添加的数据与 AEX-5EGL-8 变形链球菌在新图6H。该 NOL -6- 突变体动物是温度敏感的无菌。因此,我们的RNAi用于撞倒 NOL -6-。以前的研究表明的那击倒 NOL -6- 通过RNAi细菌定植及肠胀气你减少(富尔曼等人去了。,2009)。在我们的研究中,我们证实,目前 NOL -6- RNAi的肠胃气胀你减少(图3F,G,图3-图1b的补充,C)。因为我们正在测试肠胀气的作用(而不是功能 NOL -6- 本身)的回避行为,我们认为使用那 NOL -6- RNAi是可靠和充足。

3)在以下点是不是绝对的要求,但是这将是很好添加:本研究表明,ASJ-DAF-7的表达增加有趣的不具有相关性以避免草坪。因为ESTA的发现将是场非常重要的,这将是非常有用的,包括DAF-7,迈泽尔等因为他的良好表现提供关于DAF-7更完整的分析。示出的daf-7以及在草坪避免通过暴露于假单胞菌也增加拯救的DAF-7突变体和DAF-7的表达中的缺陷,从而也。

我们有没有添加数据 DAF-7 在神经元中,以及表达。该数据显示,表达的增加以及 DAF-7 没有草坪回避相关无论使用哪种。数据被呈现在新的数字2位数字的补充1,图3位数的补充1d和图4-图1b补充。

评审#1:

[...]

总之,是参与厌恶学习和食物选择在感染这纠正了在一个重要课题记录重要的研究,并确定了遗传学宿主与病原体。

我们感谢评审对我们工作的一个很好的总结和突出成果的重要性。

评审#2:

[...]

在这项研究结果证明肠胀气和草坪回避之间有很强的联系,并为蠕虫,避免传染性细菌的新机制。几个问题需要解决。

1)的结果和使用RNAi的分析应该由遗传实验的支持。

我们有没有添加的数据与 AEX-5EGL-8 变形链球菌在新图6H。该 NOL -6- 突变体动物是温度敏感的无菌。因此,我们用RNA干扰敲下来 NOL -6-。以前的研究表明的那击倒 NOL -6- 通过RNAi细菌定植及肠胀气你减少(富尔曼等人去了。,2009)。在我们的研究中,我们还表明, NOL -6- RNAi的肠胃气胀你减少(图3F,G,图3-图1b的补充,C)。因为我们正在测试肠胀气的作用(而不是功能 NOL -6- bt365软件app NOL -6- RNAi是足够的。

2),以往的研究表明,暴露在致病页。在这两种ASJ和井和在神经元解救要么DAF-7表达的草坪留在DAF-7的表型的DAF-7的铜绿假单胞菌的细菌增加的表达。这项工作的测试,而DAF-7和草坪留下的行为ASJ表达之间的关联,它会在通过检查使DAF-7表达进一步DAF-7功能的理解是有帮助的。

我们有没有添加数据 DAF-7 在神经元中,以及表达。该数据显示,表达的增加以及 DAF-7 没有相关草坪回避要么。数据被呈现在图2中位数的补充1,图3位数的补充1d和图4-图1b补充。

3)表示上DAF-7的结果ASJ表达原稿状态反对由先前的研究(迈泽尔等来提供的消息。,2014)。这是混乱的,迈泽尔等因为他。似乎没有提出在ASJ DAF-7即增加的表达,由致病p诱导。铜绿假单胞菌或吩嗪-1-甲酰胺和pyochelin,引发回避。相反,他们提出,它是对细菌感觉反应一个(例如为,他们关闭了商业,“我们的研究结果表明特定的细菌如何能对宿主的行为和生理和点效果如何次生代谢产物可作为环境线索,以贡献病原体歧视和避免“)。重要的是要弄清这些问题的读者更好地理解这个问题的复杂性。

我们同意审阅,我们认为这是一种复杂的问题。然而,我们想带出这迈泽尔等的。这确实建议在ASJ神经元对DAF-7的诱导促进了回避行为。迈泽尔等的。,2014在ASJ化学感觉神经元对读取“次级代谢产物吩嗪-1-甲酰胺和pyochelin激活G蛋白信号传导途径那DAF-7神经调节/ TGF-β的诱导表达。 DAF-7,反过来,激活TGF-β对经典信号通路在相邻的interneur上s调制的致病aerotaxis行为和避免促进 页。铜绿假单胞菌“。

几项研究都提到迈泽尔等的,2014年,突出了回避行为病原体的调控DAF-7的诱导ASJ中的作用,包括:。希尔伯特和金, 澳门赌场网站,2017年; H要么spool和Chang,SCI代表,2017(PMID:28322326).; Hao等的。, 澳门赌场网站,2018;和Harris等的,遗传学公共科学图书馆,2019(PMID:30849079)..

从上面的例子中,很明显,本领域的概念是,DAF-7诱导的神经元ASJ驱动器的 页。铜绿假单胞菌 回避行为。

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[...]

1)氧含量是真正的蠕虫学会识别为致病性草坪的标志或者是一个相关的信号?有没有办法来平衡致病性和非致病性劳恩斯之间的氧气水平?然后看看是否有人会蠕虫仍然可以学会避免草坪(如肠胀气和仍然存在(见点2))。或者,也许动物培训,避免页。能够在设计,测试aerotaxis自己的喜好的分析被测试铜绿?

我们提供了额外的支持aerotaxis这是在细菌的偏好(图6位数的补充2)变化的重要。修改稿写着:“我们能够引发也迅速朝偏好 即大肠杆菌 由动物暴露于5%氧气(图6-图补充2)“。

2)的关系,如果有的话,低之间/高氧和肠胀气尚不清楚。确实低氧引起在P上腹胀。铜绿假单胞菌,或可能呢?或者说作者认为,高/低氧气是蠕虫多么学习的好(如大肠杆菌)和差(铜绿假单胞菌),草坪区分?

我们感谢评审询问ESTA有趣的问题。请问如果氧气含量低可能是负责殖民化和肠胀气,我们培养N2上的动物 即大肠杆菌-GFP在8%氧含量为24小时(页。铜绿假单胞菌 草坪已知有8-10%的氧气:Reddy等的,2011)..如图6-图新的补充3,每Seare低氧水平负责细菌定植不肠和腹胀。

3)蠕虫状菌苔以较少的氧且p。劳恩斯是绿脓杆菌具有为本较少的氧气。难不成想ESTA解释了最初的吸引力到p。铜绿假单胞菌草坪?

它是很难预测,如果最初的吸引力朝 页。铜绿假单胞菌 是仅仅因为相对较低的氧水平的。因为 C。线虫 两个行为是由细菌代谢物(引诱)和氧含量进行调制,它是可能的初始吸引力是多个线索的组合。

//doi.要么g/10.7554/elife.50033.sa2

文章和作者信息

作者详细信息

  1. jogender辛格

    Department of 分子微生物学 & Immunology, Oreg上 Health & 科学 University, P要么tl和, United States
    贡献
    概念化,数据策展,正式的分析,调查,方法,写初稿,编写,审查和编辑
    利益争夺
    没有利益冲突的声明
  2. 亚历杭德罗·aballay

    Department of 分子微生物学 & Immunology, Oreg上 Health & 科学 University, P要么tl和, United States
    贡献
    概念化,数据策展形式分析,资金收购,原草案写作,项目管理,书面审查和编辑
    函授
    aballay@ohsu.edu
    利益争夺
    没有利益冲突的声明
    ORCID ic上 “这要么cid ID标识这篇文章的作者:” 0000-0002-5975-3352

资金

普通医学科学研究所(gm0709077)

  • 亚历杭德罗·aballay

过敏症和传染病研究所(ai117911)

  • 亚历杭德罗·aballay

该资助者在研究设计,数据收集和解释,或提交作品出版的决定没有任何作用。

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我们从德博拉红的实验室(哈佛医学院)感谢安妮Clatw要么thy用于提供 页。铜绿假单胞菌 PA14株 δkinbδlasr用于提供Glynis杰森升Kolling从帕潘实验室(弗吉尼亚大学) 页。铜绿假单胞菌 PA14应变 δlysc托马斯ķ伍德(宾夕法尼亚州立大学),用于提供 页。铜绿假单胞菌 PA14应变 δrhlr拉尔斯·迪特里希(哥伦比亚大学,纽约州)提供的 页。铜绿假单胞菌 PA14株 δphz (缺乏无论是 phza1-G1phza2-G2 操纵子) δphzh, δphzmδphzs和元库恩(杜克大学医学中心,NC)用于提供 页。铜绿假单胞菌 PA14应变 δptsp。在ESTA研究中使用的一些菌株是由通过研究基础设施项目的美国国立卫生研究院办公室(p40od010440)资助的线虫遗传学中心(CGC)提供。

高级编辑

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评论首页

  1. 哈维尔伊拉奥基

出版历史

  1. 收稿日期:2019年7月9日
  2. 修:2019 10月31日,
  3. 接受稿件发表: 2019年11月1日(版本1)
  4. 记录的版本发布: 2019年11月29日(第2版)

版权

©2019年,辛格和aballay

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